《求生之路2》與《求生之路1》的故事背景相同，但發生在不同的地點和時間線。兩款游戲都講述了在感染病毒后兩周，各個城市中辛存者努力逃生的故事。關于L4D2的DLC：THE PASSING，官方描述中提到，故事發生在第一關“死亡中心”之后，四位辛存者駕車逃亡，在中途遭遇車輛無油的困境。第一代游戲的四位辛存者幫助第二代游戲中的人物逃跑，其中誰會被選中犧牲是不確定的，由電腦隨機選擇。玩家無法操控第一代游戲中的玩家角色。至于為什么第一代的四人要幫助第二代，答案要等到第一代的DLC發布后才能揭曉。值得一提的是，角色BILL永遠活在玩家心中！

概述：第一代和第二代游戲的開頭章節都遵循正常的時間順序。在第二代游戲中添加的“犧牲”地圖，繼承了第一代的結尾情節，四人成功到達大橋上，但有一人犧牲以重啟發動機。而第二代地圖“消逝”則與之前的情節相連，當第二代的角色來到這里時，他們看到了第一代中已經成功過橋的三人。兩代游戲的故事線雖然各自獨立，但在某些情節上存在交叉。

背景設定：

XXXX年，在美國喬治亞州的沙瓦那爆發了一場大型流行性瘟疫。這種瘟疫由變種的狂犬病毒引起，迅速蔓延至大部分地區。感染這種病毒后的人類會變異成為喪尸，并通過攻擊他人傳播病毒。

面對這場危機，迅速組織了防疫組織——CEDA，前往感染區進行救助。CEDA的防疫措施和手段相對一般流感并無太大差異，他們誤認為病毒僅通過空氣傳播。

《求生之路》第一部的劇情為：四人通過第一大關后遭遇墜機險情，緊接著進入第二大關。最后在血腥收獲關卡，他們乘坐軍方的裝甲車前往一個臨時陣地。之后發生了一系列情節（具體可參見漫畫劇情），最終四人來到一座大橋觸發關鍵劇情。他們在豪華游艇上遭遇危機，路易斯在打開船艙時發現一群異常生物受傷險些被拖入險境。他們決定前往遠處孤島躲避，但大橋的阻礙讓他們陷入困境。啟動發電器讓大橋升起時卻意外中斷。

《求生之路》這款游戲本身劇情不多，主要通過片頭動畫和游戲關卡呈現。大致情節是狂犬病毒變異產生生化病毒，大部分人類感染成為喪尸。四位主角作為免疫者開始尋找求生之路。第一代四人經歷醫院、軍營等地最后來到橋上。而在《求生之路2：消逝》中我們發現二代主角來到這座橋時，一代人物只剩下三人，老軍人比爾在發動機室不幸犧牲。據《求生之路2：犧牲》的情節揭示，當一代四人上到橋面時發動機似乎熄火需要重啟。于是有人必須犧牲跳下去重啟發動機。之后二代四人出現開車前來在一代三人的幫助下成功過橋但選擇留下守護同伴遺體而離去。二代三人繼續南行（方向為虛構）來到更大的橋上搭乘直升機飛走據傳是前往最后一個未被病毒入侵的城市新奧爾良市。以上內容皆為虛構僅供參考。